O estudo objetivou identificar a composição fitoquímica das folhas de Lecythis pisonis Camb., além de averiguar a atividade antimicrobiana da fração hidroalcoólica contra cepas de Staphylococcus aureus (CCBH3856) e Escherichia coli (CCBH3860). O extrato das folhas foi obtido por extração, usando o método de maceração em etanol a 70% e água destilada, sob temperatura ambiente. Os testes utilizados para identificação de triterpenoides, flavonoides e saponinas foram, respectivamente, a reação de Liebermann-Burchard, Shinoda e Índice de espuma. A avaliação da ação antimicrobiana do extrato hidroalcoólico, por meio de antibiograma em ágar Mueller-Hinton, foi realizada segundo a metodologia de difusão em ágar (técnica do poço) descrita pela Farmacopeia Brasileira (2010), em cepas padrão de S. aureus e E. coli. O extrato de hidroalcoólico foi resuspendido e testado nos volumes de 20 a 60 µl. Os testes realizados para identificação dos metabólitos secundários foram positivos. O extrato hidroalcoólico testado apresentou atividade inibitória com média de halos 23,8 mm e 25,8 mm para, respectivamente, S. aureus e E. coli. Esses resultados demonstraram a presença de substâncias químicas de referência nas folhas de L. pisonis Camb. Além disso, o extrato hidroalcoólico apresentou sensibilidade em todos os volumes testados, quando comparados ao halo do controle positivo.